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核酸提取羧基磁珠200nm的介紹

2025-09-14 [34]

200nm羧基磁珠在核酸提取中具有以下特性與應用分析

一、核心特性

  1. 物理特性

    • 粒徑與分散性:200nm羧基磁珠粒徑均一,表面羧基密度可達550nmol/mg(顯著高于100nm磁珠的350nmol/mg),提供高比表面積,增強核酸吸附能力。

    • 磁響應性:超順磁性設計,磁吸時間短,便于快速分離,減少操作時間。

    • 穩定性:在pH 1-13、硫氰酸胍、DMF、DMSO等條件下穩定,適應多種核酸提取緩沖液體系。

  2. 化學特性

    • 表面功能化:羧基基團(-COOH)可通過EDC/NHS活化,與蛋白質、核酸、多肽等生物配體共價偶聯,實現特異性結合。

    • 吸附機制:在PEG和NaCl存在下,核酸構象由線狀轉變為卷曲球狀,暴露負電荷磷酸基團,通過Na+與羧基形成離子橋,實現核酸吸附。

二、核酸提取應用

  1. 常規核酸提取

    • 優勢:200nm羧基磁珠可通過調整PEG和NaCl比例,實現核酸片段的精準篩選。例如,第一輪吸附大片段核酸后棄磁珠,第二輪吸附目標片段,洗脫回收率可達85%以上(100bp以上片段)。

  2. 高通量測序文庫構建

    • 片段分選:200nm羧基磁珠配合DNA片段篩選試劑,可高效分選50-800bp片段,滿足NGS(下一代測序)對文庫片段大小的要求。

  3. 病毒核酸檢測

    • 富集能力:通過固定Oligo(dT)30中間探針,200nm羧基磁珠可高效富集冠狀病毒RNA,提高檢測靈敏度。

三、操作優勢

  1. 簡化流程:無需離心,通過磁場快速分離,減少樣本損失和交叉污染。

  2. 兼容性:適配多種試劑體系(如異丙醇、結合液),可根據樣本類型調整磁珠用量(如微量DNA提取時用量為15-20μl)。

  3. 穩定性:4℃豎直密封保存,避免冷凍及離心操作,維持分散穩定性。

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