基本信息
中文名稱:活化酯修飾的生物素
英文名稱:Biotin-NHS ester
cas:35013-72-0
分子式:C14H19N3O5S
分子量:341.38
純度:95%
外形:白色固體
存儲條件:陰涼,干燥,通風良好的庫房
包裝規格:1g、5g、10g等
注意事項:取用時一定要干燥,避免頻繁解凍和冷凍。
溶解性:溶于大部分有機溶劑,溶于水
產品:可定制
結構式:
描述
生物素-NHS 酯,也稱為生物素基- N -羥基琥珀酰亞胺,是一種常用于生物偶聯反應的化合物,用于用生物素標記蛋白質、抗體和其他生物分子。生物素是一種水溶性 B 族維生素,對鏈霉親和素有很高的親和力,這使其成為各種生化測定和實驗中的有用工具。
結構和性質:
生物素-NHS 酯由通過酯鍵與 N - 羥基琥珀酰亞胺(NHS)基團連接的生物素分子組成。NHS 基團對伯胺有反應性,例如蛋白質中賴氨酸殘基或肽的氨基末端的那些。這種反應性允許生物素- NHS 酯與這些胺形成穩定的酰胺鍵,從而將生物素部分與目標分子偶聯。
用途:
蛋白質標記: 生物素-NHS 酯廣泛用于用生物素標記蛋白質,然后可以使用基于鏈霉親和素的方法進行檢測或純化。這在蛋白質相互作用研究、蛋白質定量測定和免疫沉淀實驗中特別有用。
抗體標記: 可以使用生物素-NHS 酯用生物素標記抗體,使其能夠在各種免疫測定中檢測或擴增,例如 ELISA、Western blot 和流式細胞術。
核酸標記: 雖然不如蛋白質標記常見,但生物素-NHS 酯也可用于標記核酸,特別是寡核苷酸,用于 DNA 測序和雜交測定等應用。
細胞表面標記: 生物素-NHS 酯可用于標記細胞表面蛋白,便于研究細胞表面相互作用和分離特定細胞群。
實驗方案:
生物素-NHS 酯的使用通常包括以下步驟:
準備: 將生物素-NHS 酯溶解在合適的溶劑(例如 DMSO)中以制備儲備溶液。
反應: 在適當的條件(pH、溫度)下將目標蛋白質或生物分子與生物素-NHS 酯溶液孵育。
終止: 通過添加終止劑(例如 Tris 緩沖液)來停止反應,以中和任何未反應的生物素-NHS 酯。
純化: 通過純化步驟(例如透析、色譜)去除多余的試劑和未反應的生物素-NHS 酯。
注意事項:
特異性: 確保標記反應具有特異性,并且不會修飾目標分子的關鍵官能團。
優化: 優化反應條件(例如生物素-NHS 酯的濃度、反應時間),以在不影響生物分子的活性或功能的情況下達到所需的標記水平。
儲存: 將生物素-NHS 酯在低溫(例如 -20°C)下儲存以防止降解。
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